efm-19细胞培养说明 （人乳腺癌细胞）
细胞：efm-19细胞
中文名称：人乳腺癌细胞
生长特性：贴壁细胞
培养基：1640培养基 血清：10%fbs（gibco胎牛血清）
荧光株：efm-19-rfp荧光标记细胞株 efm-19-gfp荧光标记细胞株efm-19-luc荧光标记细胞株
耐药株：efm-19-ddp耐药株 efm-19-ptx耐药株 efm-19-adm耐药株
细胞检测服务：efm-19细胞鉴定（细胞检测技术服务可直接咨询客服 ）
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adv核酸检测实验
实验目的：检测动物血清或血浆、肝、脾、淋巴结组织等样本中(adv)dna，其检测结果仅供临床参考。
实验原理：选取一对(adv)特异性引物和一条特异性荧光探针，应用碱裂解法提取dna，后者在耐热dna聚合酶(taq酶)作用下，配以fq-buffer(内含mgp2+p、tris-hcl等)、四种核苷酸单体(dntps)等成分，通过pcr-荧光探针体外扩增法对(adv)进行扩增，从而达到快速实时定量检测之目的。
适用标本类型：疑似动物血清或血浆、肝、脾、淋巴结组织和咽拭子等样本。
标本采集：
血清：用无菌注射器抽取受检动物静脉血2毫升，注入无菌5ml干燥管(或含促凝剂)，立即轻轻颠倒管子混合5至10次，密闭送检。
肝、脾、淋巴结等组织：取可疑部位组织1g，转至一洁净的1.5ml的离心管中，密闭送检。
保存和运输：标本可立即用于测试， 2-8℃保存下不应超过24小时； -70℃以下长期保存。避免反复冻融。标本运送时应采用0℃冰壶。
efm-19细胞常规培养传代流程（ 请严格遵照无菌操作）
1． 吸出原培养瓶中的培养基，pbs 缓冲液润洗细胞两次，加 2-3 ml 0.25% yi酶进行消化细胞（注意把握消化时间，通常控制在 1-2min）
2． 镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时（不建议消化到细胞漂浮）去掉yi酶，加 6~8ml 培养基，轻轻吹打细胞层，尽量把细胞层吹落，吹散。
3． 取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中，添加适当的培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养。
4． 注意培养基 ph 值变化情况，定期换液（每周 2-3 次），待细胞密度达到 80%以后重复 1 项操作或者冻存。
efm-19细胞签收操作：
1. 收到细胞后请尽快更换为含 15% 血清的新鲜培养基，如因特殊情况需要继续使用原瓶培养基，请在原瓶培养基中额外添加 10% 的血清（原瓶培养基的继续使用时间最长不宜超过 72 小时）
2. 贴壁细胞收到后切忌立刻进行消化，将细胞换液后放置培养箱孵育 6-8 小时或过夜再做消化传代。
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关键词：培养箱